Estudios de estructuras de ARN que regulan la replicación del virus del dengue en humanos y mosquitos

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El virus de dengue es el principal patógeno humano transmitido por mosquitos para el cualaún no existen tratamientos antivirales efectivos. El genoma viral es una molécula de ARNcompuesta por un único marco de lectura abierto flanqueado por las regiones 5' y 3' nocodificantes. Mediante la...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Villordo, Sergio Manuel
Formato: Tesis Doctoral
Lenguaje:Español
Publicado: 2015
Materias:
DENGUE
FLAVIVIRUS
ARN
ESTRUCTURA SECUNDARIA DE ARN
REPLICACION VIRAL
SINTESIS DE ARN VIRAL
CONSERVACION DE ESTRUCTURAS DE ARN
INTERACCION VIRUS-CELULA
RNA
SECONDARY RNA STRUCTURE
VIRAL REPLICATION
RNA SYNTHESIS
RNA STRUCTURE CONSERVATION
VIRUS-HOST INTERACTION
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6001_Villordo
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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description El virus de dengue es el principal patógeno humano transmitido por mosquitos para el cualaún no existen tratamientos antivirales efectivos. El genoma viral es una molécula de ARNcompuesta por un único marco de lectura abierto flanqueado por las regiones 5' y 3' nocodificantes. Mediante la manipulación genética de clones infecciosos y ensayos funcionaleshemos, demostrado que la estructura del ARN en los extremos del genoma es dinámica yque la formación regulada de conformaciones alternativas es necesaria para la síntesis del ARN viral en células de mamíferos. Experimentos complementarios en células de mosquitoconfirmaron además la importancia de este fenómeno en ambos hospedadores y permitierondetectar una secuencia en el extremo 3' del genoma que funciona como un determinanteespecífico para la replicación del virus en insectos. Por otro lado, la combinación de estudiosde mapeo químico y análisis de conservación de la región 3' no codificante han revelado laexistencia de estructuras de ARN que se mantienen conservadas entre distintos flavivirustransmitidos por insectos. El análisis de esta región mediante experimentos de adaptación encélulas y técnicas de secuenciación masiva ha permitido caracterizar una estructura de ARNque se adapta de manera diferencial durante la infección en mosquitos y mamíferos. Ademása través de ensayos de mutagénesis dirigida y el estudio del fitness viral en células ymosquitos adultos se demostró que la duplicación de dicha estructura facilita la alternanciade hospedadores con requerimientos diferentes. En conjunto los resultados de esta tesisproveen nuevos conocimientos sobre la biología del dengue de posible utilidad para eldesarrollo racional de estrategias antivirales. Asimismo, la información aquí presentadapermitirá entender aspectos epidemiológicos y evolutivos de virus de ARN transmitidos porinsectos con relevancia en salud pública.
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