Caracterización de la proteína de 24 kDa de PVX, y obtención de plantas transgénicas resistentes a tobamovirus

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La proteína de 24 kDa (p24) del potato virus X (PVX) es una de las tresproteínas responsables del transporte de este virus en plantas infectadas. Eneste trabajo de Tesis se obtuvieron anticuerpos específicos contra p24, con loscuales se pudo detectar y caracterizar su expresión en protoplastos y en...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Ares, Vera Ximena
Formato: Tesis Doctoral
Lenguaje:Español
Publicado: 1997
Materias:
MOVEMENT PROTEIN
TRIPLE GENE BLOCK
PLANT VIRUS
PVX
TMV
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2975_Ares
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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spelling todo:tesis_n2975_Ares2023-10-03T12:35:09Z Caracterización de la proteína de 24 kDa de PVX, y obtención de plantas transgénicas resistentes a tobamovirus Characterization of the 24 kDa protein of potato virus X, and production of transgenic plants with resistance to tobamovirus Ares, Vera Ximena MOVEMENT PROTEIN TRIPLE GENE BLOCK PLANT VIRUS PVX TMV La proteína de 24 kDa (p24) del potato virus X (PVX) es una de las tresproteínas responsables del transporte de este virus en plantas infectadas. Eneste trabajo de Tesis se obtuvieron anticuerpos específicos contra p24, con loscuales se pudo detectar y caracterizar su expresión en protoplastos y en tejido deplantas de tabaco infectadas. También, se obtuvieron plantas transgénicas queexpresan p24 y que pueden complementar el transporte de un mutante de PVXdefectivo en este gen. Las plantas transgénicas que producen altos niveles dep24 presentan un fenotipo alterado, que consiste en plantas enanas y cloróticas. Estas plantas mostraron resistencia a la infección con los tobamovirus tobaccomosaic virus (TMV)y tomate virus Ob (ToMV-Ob). Sin embargo, cuando se lasinfectó con PVX o con el potato virus Y (PVY), no mostraron diferencias en losniveles de virus con respecto a las plantas no transformadas, aunque lossíntomas de infección con PVX fueron más severos. Recíprocamente, las plantastransgénicas que expresan la proteína de movimiento (MP) de TMV mostraronresistencia a PVX cuando se inocularon con este virus. Por último, se realizaronestudios de complementación entre mutantes de TMV y de PVX defectivos entransporte, con las plantas transgénicas que expresan p24 y la MP de TMV, paraestudiar el grado de interacción entre los sistemas de transporte de ambos virus. The p24 protein, one of the three proteins implicated in local movement ofpotato virus X (PVX). was expressed in transgenic tobacco plants (Nicotianatabacum, Xanthi D8 NN). Plants with the highest level of p24 accumulationexhibited a stunted and slightly chlorotic phenotype. These transgenic plantsfacilitate the cell-to-cell movement of a mutant of PVXthat contained a frameshiftmutation in p24, indicating that the transgenic protein provides movement functionand is able to act in trans. Upon inoculation with tobacco mosaic virus (TMV),thesize of necrotic local lesions was significantly smaller in p24 plants than in nontransgenic.control plants. Resistance to tobamoviruses was also evidenced afterinoculation of p24 plants with Ob, a virus that evades the hypersensitive responseprovided by the N gene. In the later case. no systemic symptoms were observed.and virus accumulation remained low or undetectable by Western immunoblotanalysis and back-inoculation assays. In contrast, no differences were observed invirus accumulation after inoculation with PVX, although more severe symptomswere evident on p24 expressing plants compared with control plants. Similarly,infection assays conducted with potato virus Y (PVY) showed no differencesbetween control and transgenic plants. On the other hand, a considerable delay invirus accumulation and symptom development was observed when transgenictobacco plants containing the MP of TMV were inoculated with PVX. Finally, amovement detective mutant of TMV was inoculated on p24 plants or in mixedinfections with PVX on non-transgenic plants. Both types of assays failed toproduce TMV infections, implying that TMV MP is not interchangeable with the PVX movement proteins. Fil: Ares, Vera Ximena. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 1997 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2975_Ares
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