Ecofisiología de anuros : aspectos del catabolismo del nitrógeno en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental

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Se estudiaron aspectos del catabolismo de productos nitrogenados en anuros de diferentesespecies, en distintos momentos de su ciclo de vida, en condiciones fisiológicas y de estrésambiental. Se evaluaron los productos de excreción nitrogenada urinaria (amoníaco, urea y ácidoúrico), la urea en plasma...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal:	Rovedatti, María Gabriela
Formato:	Tesis Doctoral
Lenguaje:	Español
Publicado:	1995
Materias:	BUFO ARENARUM LEPTODACTYLUS OCELLATUS BUFO CHILENSIS BUFO GRANULOSUS METABOLISMO NITROGENADO ANUROS ADULTOS EMBRIONES LARVAS EXCRECIÓN NITROGENADA URINARIA ONTOGÉNESIS ARGINASA URICASA ESTRÉS OSMÓTICO CADMIO SUBLETAL NITROGEN METABOLISM ADULT ANURAN EMBRYOS LARVAE URINARY NITROGEN EXCRETION ONTOGENY ARGINASE URICASE OSMOTIC STRESS CADMIUM SUBLETHAL
Acceso en línea:	https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2776_Rovedatti
Aporte de:	Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires

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description	Se estudiaron aspectos del catabolismo de productos nitrogenados en anuros de diferentesespecies, en distintos momentos de su ciclo de vida, en condiciones fisiológicas y de estrésambiental. Se evaluaron los productos de excreción nitrogenada urinaria (amoníaco, urea y ácidoúrico), la urea en plasma y la actividad específica de la arginasa y la uricasa. Se obtuvo el perfil de los productos de excreción nitrogenada urinaria de adultos Bufoarenarum, Leptodactylus ocellatus, Bufo granulosus, y Bufo chilensis de habitat terrestre,semiacuático, cavícola y montañoso respectivamente. La urea fue el componentemayoritario en la orina de todas las especies y se hallaron pequeñas cantidades de ácidoúrico en las tres primeras. Se estudió el efecto de la dieta y el ayuno sobre el metabolismo de sustanciasnitrogenadas para lo cual se dosó la actividad de la arginasa hepática, los productos deexcreción nitrogenada urinaria y la urea en plasma en adultos de Bufo arenarum sometidosal consumo de diferentes cantidades de proteína. El ayuno redujo significativamente laactividad específica de la arginasa y aumentó el contenido total de proteínas hepáticas. Lapartición de los productos excretados resultó independiente de la ingesta de proteínas. Se realizó un seguimiento de la actividad de la arginasa en homogenatos totales deembriones a lo largo de 17 estadíos y el primer estadío larval de Bufo arenarum incubadosen solución de Holtfreter diluída. La enzima fue detectada a partir del estadío de tuboneural y se observó un pequeño incremento en los estadios tempranos, el cual se tornó máspronunciado en la fase embrionaria final. La actividad se duplicó en el primer estadío larvalcoincidiendo con el momento en que los animales comienzan a alimentarse. La actividad de la arginasa hepática en larvas de Bufo arenarum de estadio 29 fuenotablemente más alta que en el homogenato total de larvas de estadio 26; no obstante, lamisma se mantuvo dos órdenes de magnitud por debajo de la actividad determinada en elhígado de adultos. Se evaluó la actividad de la arginasa embrionaria de Brgfoarenarum, en homogenatostotales en condiciones de estrés osmótico, desarrollando a los animales desde la fecundaciónen: agua destilada (simulando una sobrehidratación) y en solución de Holtfreter concentrada (simulando una ligera deshidratación) y se comparó con animales desarrollados encondiciones control (mantenidos en solución de Holtfreter). En los tres grupos la actividadcreció a lo largo del tiempo. A partir del estadio de circulación branquial la actividad fuemenor en el grupo de solución concentrada. En el último estadío embrionario, opérculocompleto, la actividad específica de los tres grupos no presentó diferencias significativas. El estudio de la actividad de la uricasa hepática en homogenatos totales de embrionesdesde el estadío de opérculo completo, de larvas (estadio 29), juveniles (estadío 35) yadultos de Bufo arenarum indicó que la misma aumentó a medida que avanzó el desarrollosiendo significativa la diferencia entre el adulto y los estadios larvales. En hígado de larvasde estadío 29 mantenidas en solución de Holtfreter, agua destilada y solución de Holtfreterconcentrada se encontró que la uricasa aumentó en la situación concentrada. Se comparó la actividad de la uricasa hepática de adultos de Bufo arenarum y Leptodactylus ocellatus siendo significativamente menor la de la segunda especie. Se evaluó la actividad de la arginasa en hígado de adultos de Bufo arenarum inyectadoscon cadmio, considerando a este metal como otro factor estresante ambiental. La mismadisminuyó significativamente después de la inyección de cantidades subletales del metal. Se concluyó: l. El perfil de excreción nitrogenada no sería el mejor indicador de los ambientes queocupan los anfibios adultos en cuanto a la disponibilidad de agua; la orina de los adultosde todas las especies estudiadas presentó cantidades medibles de ácido úrico. 2. La cantidad de proteínas ingerida por los anuros adultos modifica la actividad de laarginasa. 3. La actividad de la arginasa se detecta tempranamente en los embriones de Bufoarenarum y se incrementa a lo largo del desarrollo. 4. La arginasa embrionaria se ve reducida frente a un estrés osmótico al comienzo deldesarrollo. 5. La uricasa aparece mas tardíamente en los embriones de Bufo arenarum que la arginasay se incrementa a lo largo del desarrollo. 6. La actividad de la uricasa hepática en adultos podría ser considerada como unparámetro indicador del grado de terrestrialidad de los anuros ureotélicos. 7. En hígado de larvas la uricasa aumenta debido al estrés osmótico. 8. El cadmio inyectado a Bufo arenarum adultos provoca una reducción en la actividadde la arginasa hepática.
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Se obtuvo el perfil de los productos de excreción nitrogenada urinaria de adultos Bufoarenarum, Leptodactylus ocellatus, Bufo granulosus, y Bufo chilensis de habitat terrestre,semiacuático, cavícola y montañoso respectivamente. La urea fue el componentemayoritario en la orina de todas las especies y se hallaron pequeñas cantidades de ácidoúrico en las tres primeras. Se estudió el efecto de la dieta y el ayuno sobre el metabolismo de sustanciasnitrogenadas para lo cual se dosó la actividad de la arginasa hepática, los productos deexcreción nitrogenada urinaria y la urea en plasma en adultos de Bufo arenarum sometidosal consumo de diferentes cantidades de proteína. El ayuno redujo significativamente laactividad específica de la arginasa y aumentó el contenido total de proteínas hepáticas. Lapartición de los productos excretados resultó independiente de la ingesta de proteínas. Se realizó un seguimiento de la actividad de la arginasa en homogenatos totales deembriones a lo largo de 17 estadíos y el primer estadío larval de Bufo arenarum incubadosen solución de Holtfreter diluída. La enzima fue detectada a partir del estadío de tuboneural y se observó un pequeño incremento en los estadios tempranos, el cual se tornó máspronunciado en la fase embrionaria final. La actividad se duplicó en el primer estadío larvalcoincidiendo con el momento en que los animales comienzan a alimentarse. La actividad de la arginasa hepática en larvas de Bufo arenarum de estadio 29 fuenotablemente más alta que en el homogenato total de larvas de estadio 26; no obstante, lamisma se mantuvo dos órdenes de magnitud por debajo de la actividad determinada en elhígado de adultos. Se evaluó la actividad de la arginasa embrionaria de Brgfoarenarum, en homogenatostotales en condiciones de estrés osmótico, desarrollando a los animales desde la fecundaciónen: agua destilada (simulando una sobrehidratación) y en solución de Holtfreter concentrada (simulando una ligera deshidratación) y se comparó con animales desarrollados encondiciones control (mantenidos en solución de Holtfreter). En los tres grupos la actividadcreció a lo largo del tiempo. A partir del estadio de circulación branquial la actividad fuemenor en el grupo de solución concentrada. En el último estadío embrionario, opérculocompleto, la actividad específica de los tres grupos no presentó diferencias significativas. El estudio de la actividad de la uricasa hepática en homogenatos totales de embrionesdesde el estadío de opérculo completo, de larvas (estadio 29), juveniles (estadío 35) yadultos de Bufo arenarum indicó que la misma aumentó a medida que avanzó el desarrollosiendo significativa la diferencia entre el adulto y los estadios larvales. En hígado de larvasde estadío 29 mantenidas en solución de Holtfreter, agua destilada y solución de Holtfreterconcentrada se encontró que la uricasa aumentó en la situación concentrada. Se comparó la actividad de la uricasa hepática de adultos de Bufo arenarum y Leptodactylus ocellatus siendo significativamente menor la de la segunda especie. Se evaluó la actividad de la arginasa en hígado de adultos de Bufo arenarum inyectadoscon cadmio, considerando a este metal como otro factor estresante ambiental. La mismadisminuyó significativamente después de la inyección de cantidades subletales del metal. Se concluyó: l. El perfil de excreción nitrogenada no sería el mejor indicador de los ambientes queocupan los anfibios adultos en cuanto a la disponibilidad de agua; la orina de los adultosde todas las especies estudiadas presentó cantidades medibles de ácido úrico. 2. La cantidad de proteínas ingerida por los anuros adultos modifica la actividad de laarginasa. 3. La actividad de la arginasa se detecta tempranamente en los embriones de Bufoarenarum y se incrementa a lo largo del desarrollo. 4. La arginasa embrionaria se ve reducida frente a un estrés osmótico al comienzo deldesarrollo. 5. La uricasa aparece mas tardíamente en los embriones de Bufo arenarum que la arginasay se incrementa a lo largo del desarrollo. 6. La actividad de la uricasa hepática en adultos podría ser considerada como unparámetro indicador del grado de terrestrialidad de los anuros ureotélicos. 7. En hígado de larvas la uricasa aumenta debido al estrés osmótico. 8. El cadmio inyectado a Bufo arenarum adultos provoca una reducción en la actividadde la arginasa hepática. We studied aspects of nitrogen catabolism of different species of anurans, in variosstages of their life cycle, under physiological and stress conditions. Urinary nitrogen waste products (urea, ammonia and uric acid), plasma urea and thespecific activity of arginase and uricase were evaluated; urine of adult of all studied speciescontained mensurable amounts of uric acid. The nitrogen waste product profile of Bufo arenarum, Leptodactylus ocellalus, Bufogranulosus, and Bufo chilensis of terrestrial, semi-aquatic, fossorial, and mountainoushabitats respectively was obtained. Urea was the principal component in the urine of all thespecies, and small amounts of uric acid were found in the three first ones. The effect of diet and fasting on the nitrogen metabolism was studied. For this purpose,determinations of specific activity of hepatic arginase, urinary nitrogen excretion productsand plasma urea were made in adult Bufo arenarum submitted to diets with different levelsof protein. Fasting reduced arginase specific activity and increased total hepatic proteincontent. The distribution of excreted products proved to be independent of the ingestedproteins. A screening of arginase activity in total homogenates of embryos was made along l7stages and in the first larval stage of Bufo arenarum raised in Holtfreter solutions. Theenzyme was detected from the stage of neural tube and a gradual increase in the earlystages was observed, which became more pronounced at the end of embryonic development. The activity increased two fold at the beginning of larval stages when the animals start tofeed. Hepatic arginase activity in Bufo arenarum tadpoles of stage 29 was remarkably higherthan in total homogenates of stage 26 tadpoles; however, it remained two magnitude ordersbelow the adult hepatic activity. Embryonic arginase activity of Bufo arenarum was evaluated in total homogenates inmild osmotic stress conditions, developing the animals from fertilization in: distilled water (simulating an overhydratation) and concentrated Holtfreter solutions (simulating slightdehydratation) and was compared with animals in control conditions (raised in Holtfretersolutions). In the three groups the activity increased with time. From the stage of gillcirculation on the activity was lower in the group of concentrated solution. In the lastembryonic stage, complete operculum, the specific activity of the three groups did notpresent significant differences. The study of hepatic uricase activity in total homogentes of embryos beginning at thestage of complete operculum, of tadpoles (stage 29), juveniles (stage 35) and adults of Bufoarenarum indicated that it was higher as the development advanced, the difference betweenthe adults with respect to the other two stages being significant. In tadpoles of stage 29 livermantained in Holtfreter solution, distilled water and concentrated Holtfreter solution it wasfound that uricase was increased in the concentrated situation. Hepatic uricase activity of adult Bufo arenarum and Leptodactylus ocellatus wascompared, the one of the second species being significantly lower. Hepatic arginase activity of adult Bufo arenarum injected with cadmium was evaluatedconsidering this metal as an anthropogenic environmental stressant. It decreasedsignificantly after the injection of sublethal amounts of the metal. It was concluded that: 1. The nitrogen excretion profile would not be the best indicator of the environment ofthe adult amphibians in terms of water availability. 2. Arginase activity is modified by the amount of proteins taken by adult anuran. 3. Arginase activity is detected early in Bufo arenarum embryos and it increases alongits development. 4. Osmotic stress reduced embryonic arginase activity at the beginning of thedevelopment. 5. Uricase appears later than arginase in Bufo arenarum embryos, and it increases alongthe development. 6. Adult hepatic uricase activity could be considered as an indicator parameter of theterretriality of ureotelic anurans. 7. Osmotic stress increased tadpole liver uricase activity. 8. Cadmium injected to adult Bufo arenarum provokes reduction in hepatic arginaseactivity. Fil: Rovedatti, María Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 1995 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2776_Rovedatti

Ecofisiología de anuros : aspectos del catabolismo del nitrógeno en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental

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