Caracterización molecular de la relación hospedante-patógeno en el sistema trigo-roya de la hoja

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Polipéptidos relacionados con la interacción hospedante-patógeno en el sistema trigo-roya de la hoja Un problema central de la fitopatologia es esclarecer losmecanismos de defensa a las enfermedades. Se reconoció lapresencia de genes específicos que interactúan determinando eltipo de interacción. Lo...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Heinz, Ruth Amelia
Formato: Tesis Doctoral
Lenguaje:Español
Publicado: 1991
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2457_Heinz
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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spelling todo:tesis_n2457_Heinz2023-10-03T12:29:51Z Caracterización molecular de la relación hospedante-patógeno en el sistema trigo-roya de la hoja Heinz, Ruth Amelia Polipéptidos relacionados con la interacción hospedante-patógeno en el sistema trigo-roya de la hoja Un problema central de la fitopatologia es esclarecer losmecanismos de defensa a las enfermedades. Se reconoció lapresencia de genes específicos que interactúan determinando eltipo de interacción. Los mecanismosmoleculares que determinansi una interacción es compatible o incompatible no han sido aúnsuficientemente dilucidados. Se postula que los mRNAs yproteinas especificos codificados por estos genes, seinducirían en una etapa temprana en el reconocimiento de ambosorganismos. El sistema trigo-roya de la hoja fue elegido como modelopara el estudio de relaciones hospedante-patógeno altamenteespecíficas. Se utilizaron dos lineas isogénicas de trigo (Triticum aestivum) y tres clones genéticamente relacionadosdel patógeno (Puccinia recondita tritici). Este material confondo genético común permite la identificación de polipéptidosy de mRNAs específicos inducidos a causa de la infección con elpatógeno. En primer lugar se caracterizaron los cambiospolipeptidicos inducidos a lo largo del proceso de infección através del marcado “in vivo“ con 35S-Metionina de proteínassintetizadas "de novo“. En segundo lugar se caracterizaron losmRNAs inducidos en las distintas interaccioneshospedante-patógeno a través de la síntesis "in vitro” depolipéptidos en un sistema libre de células. Se analizaron lospatrones electroforéticos de estos polipéptidos en gelesdesnaturalizantes de poliacrilamida y posterior fluorografia. Curvas de tiempo mostraron que los primeros cambiospolipeptidicos tanto "in vivo“ como “in vitro” se detectaronhacia el tercer día del proceso de infección. La comparación deseis interacciones caracterizadas y sus respectivos controlessin inocular permitió asignar la inducción o disminución dedeterminadas bandas polipeptidicas a interacciones entregenes/alelos del hospedante y genes del patógeno. En estecontexto se detectó: a) inducción específica tanto a nivel de RNA como deproteinas en interacciones compatibles (bandas de 85, 15 y 24kDa) e incompatibles (bandas de 39 y 21,5 kDa). b) disminución específica de polipéptidos "in vivo” (52 y 37 kDa) e “in vitro" (34 kDa). c) dos mRNAs (20,5 y 32,5 kDa) inducidos especificamente enlas interacciones que involucran a la raza F01independientemente del hospedante. Se concluye la existencia de asociaciones entre mRNAs yproteinas inducidas con interacciones compatibles comoincompatibles por lo que el reconocimiento específico para elsistema trigo-roya de la hoja podría estar determinado por unasu otras (o ambas) según los genes interactuantes. Se aislaronclones de cDNA diferenciales correspondientes a RNA mensajerosinducidos en el sistema compatible Gamma 1R-F01 hacia el dia 5del proceso de infección que codificarían para polipéptidosespecíficos de interacción o específicos de raza. Estos clonespodrán ser utilizados para llegar a aislar los genes queintervienen en el reconocimiento de hospedante y patógeno. Simultáneamente se identificó un marcador génicocorrespondiente a una secuencia codificante de una proteina dereserva (gliadina) que está ligada a alguno de los genes dereacción a roya de la hoja y que podría utilizarse como víaalternativa para aislar los genes de interés. Fil: Heinz, Ruth Amelia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. 1991 Tesis Doctoral PDF Español info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2457_Heinz
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