Estudio de la expresión de los mensajeros de las subunidades de la PKA durante el crecimiento vegetativo y la transición dimórfica en Candida albicans

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En este trabajo se estudió la expresión de TPK1, TPK2 y BCY1 durante el crecimiento vegetativo y la transición dimórfica en medio líquido con NAcGlc a 37°C en distintas cepas de C. albicans. Durante el crecimiento vegetativo de la cepa parental CAI4, el patrón de expresión de TPK1 y TPK2 varió en fo...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Souto, Guadalupe Inés
Otros Autores: Di Bernardo de Passeron, María Susana
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2007
Materias:
CANDIDA ALBICANS
PKA
CRECIMIENTO VEGETATIVO
TRANSICION DIMORFICA
NIVELES DE ARNM
3´-RACE
SITIOS DE POLI(A)
MODELOS ESTRUCTURALES
VEGETATIVE GROWTH
DIMORPHIC TRANSITION
MRNA LEVELS
POLY(A) SITES
STRUCTURAL MODELS
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4074_Souto
Aporte de:
Biblioteca Digital - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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Souto, Guadalupe Inés
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description En este trabajo se estudió la expresión de TPK1, TPK2 y BCY1 durante el crecimiento vegetativo y la transición dimórfica en medio líquido con NAcGlc a 37°C en distintas cepas de C. albicans. Durante el crecimiento vegetativo de la cepa parental CAI4, el patrón de expresión de TPK1 y TPK2 varió en forma similar, alcanzando su máxima expresión en la fase de crecimiento logarítmica tardía. En todos los estadios medidos los niveles del ARNm de TPK1 fueron menores a los de TPK2. Los niveles de expresión de TPK1 y TPK2 en las correspondientes mutantes de tpk, fueron similares a los de la CAI4, sugiriendo que la ausencia de una de las isoformas de C no es compensada por la sobreexpresión de la otra. Se demostró que la mayor parte de la actividad quinasa en la cepa parental es aportada por Tpk2p. Resultados de Western blot confirmaron que la expresión y/o estabilidad de BCY1 depende de la presencia de los dos genes de C. Durante la transición dimórfica, en la cepa tpk2 se observó un aumento en el nivel de expresión de TPK1 y de la actividad de PKA correlacionados con la aparición de los tubos germinativos. Además, en diferentes medios de cultivos se observó que la cepa tpk1 mostró un marcado retraso en el proceso morfogenético en comparación con las cepas CAI4 y tpk2, sugiriendo que Tpk1p sería importante para la rápida aparición de los tubos germinativos. Se observaron dos transcriptos de TPK2, uno mayoritario de 1.8 kb y uno minoritario de 1.4 kb. Mediante experimentos de 3´- RACE se determinó que ambos se originan a partir del reconocimiento de tres señales de poli(A) presentes en la región 3´UTR del gen. Finalmente, pequeñas diferencias observadas en modelos estructurales de las dos isoformas de C podrían dar cuenta de la especificidad de ambas.
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