Evaluación citotóxica y morfológica de células gliales expuestas al extracto de Prosopis flexuosa
Juliprosine y juliprosopine son alcaloides piperidínicos y son los principales componentes tóxicos presentes en las vainas de Prosopis flexuosa, capaces de producir sintomatología nerviosa en rumiantes. A partir del extracto se pretende determinar la concentración citotóxica 50 (CC50) y evaluar posi...
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| Formato: | Reunión |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica
2024
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I48-R184-123456789-560742025-02-10T13:05:02Z Evaluación citotóxica y morfológica de células gliales expuestas al extracto de Prosopis flexuosa Cabrera Benítez, Angélica María Astrocitos Cc50 Alcaloides Juliprosine y juliprosopine son alcaloides piperidínicos y son los principales componentes tóxicos presentes en las vainas de Prosopis flexuosa, capaces de producir sintomatología nerviosa en rumiantes. A partir del extracto se pretende determinar la concentración citotóxica 50 (CC50) y evaluar posibles alteraciones morfológicas y la expresión de GFAP en la línea celular C6. En los ensayos de citotoxicidad se emplearon la línea C6 células de glioma (ATCC:CCL-107TM), las células resuspendidas se sembraron en placas de 96 pocillos, 30.000 a 35.000 células por pocillo, en el mismo medio de crecimiento (DMEM-SFB 10%). Al alcanzar la monocapa con un 80% de confluencia, se retiró el medio de cultivo y diferentes concentraciones del extracto de P. flexuosa (5-50 μg/ml) fueron adicionados a las células en cultivo (200 μL/pocillo) y se incubaron por 48h a 37°C y 5% de CO2. Se evaluó cuantitativamente la viabilidad mediante el colorante cristal violeta. Para el análisis morfológico se empleo la tinción de Rosenfeld y la inmunocitoquimica con el anticuerpo GFAP. Los resultados evidenciaron que el extracto de P. flexuosa disminuye la viabilidad celular de manera dosis dependiente. La concentración citotóxica 50% (CC50) determinada 48h después de la exposición fue de 35,68 μg/mL. Se registraron alteraciones morfológicas en los vidrios tratados con 10 y 15 μg/ml de extracto, las que incluyeron células con prolongaciones gruesas e irregulares, retracción de cuerpos celulares, diversos grados de condensación de la cromatina, vacuolización citoplasmática y algunas células agrupadas en pequeños cúmulos. A la inmunocitoquimica, los niveles de expresión de GFAP fueron menores en las células tratadas con 20 μg/ml (21,14±3,7 %) con respecto al control (28,55 ±3,1 %). Las alteraciones morfológicas observadas junto a la pérdida de GFAP, posiblemente precedan a la muerte celular. 2024-10-15T12:27:42Z 2024-10-15T12:27:42Z 2022-06-09 Reunión Cabrera Benítez, Angélica María, 2022. Evaluación citotóxica y morfológica de células gliales expuestas al extracto de Prosopis flexuosa. En: XXVII Comunicaciones Científicas y Tecnológicas. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica, p. 1-1. http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/56074 spa UNNE/PI/17B007/AR. Corrientes/ Estudios in vivo e in vitro sobre plantas neurotóxicas que afectan a los animales de producción del Norte Argentino. openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ application/pdf p. 1-1 application/pdf Universidad Nacional del Nordeste. Secretaría General de Ciencia y Técnica |
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Juliprosine y juliprosopine son alcaloides piperidínicos y son los principales componentes tóxicos presentes en las vainas de Prosopis flexuosa, capaces de producir sintomatología nerviosa en rumiantes. A partir del extracto se pretende determinar la concentración citotóxica 50 (CC50) y evaluar posibles alteraciones morfológicas y la expresión de GFAP en la línea celular C6. En los ensayos de citotoxicidad se emplearon la línea C6 células de glioma (ATCC:CCL-107TM), las células resuspendidas se
sembraron en placas de 96 pocillos, 30.000 a 35.000 células por pocillo, en el mismo medio de crecimiento (DMEM-SFB 10%). Al alcanzar la monocapa con un 80% de confluencia, se retiró el medio de cultivo y diferentes concentraciones del extracto de P. flexuosa (5-50 μg/ml) fueron adicionados a las células en cultivo (200 μL/pocillo) y se incubaron por 48h a 37°C y 5% de CO2. Se evaluó cuantitativamente la viabilidad mediante el colorante cristal violeta. Para el análisis morfológico se empleo la tinción de Rosenfeld y la inmunocitoquimica con el anticuerpo GFAP. Los resultados evidenciaron que el extracto de P. flexuosa disminuye la viabilidad celular de manera dosis dependiente. La concentración citotóxica 50% (CC50) determinada 48h después de la exposición fue de 35,68 μg/mL. Se registraron alteraciones morfológicas en los vidrios tratados con 10 y 15 μg/ml de extracto, las que
incluyeron células con prolongaciones gruesas e irregulares, retracción de cuerpos celulares, diversos grados de condensación de la cromatina, vacuolización citoplasmática y algunas células agrupadas en pequeños cúmulos. A la inmunocitoquimica, los niveles de expresión de GFAP fueron menores en las células tratadas con 20 μg/ml (21,14±3,7 %) con respecto al control (28,55 ±3,1 %). Las alteraciones morfológicas observadas junto a la pérdida de GFAP, posiblemente precedan a la muerte celular. |
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