Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico

El objetivo planteado en el presente trabajo consiste en la búsqueda y puesta a punto de un nuevo método inmunoprofiláctico frente a la Babesiosis bovina, que implique una vacuna en su versión deshidratada. Para esto, se realizó la comparación de técnicas de deshidratación de glóbulos rojos (GR), co...

Descripción completa

Guardado en:
Detalles Bibliográficos
Autor principal: Solís, José Alberto
Otros Autores: Lozina, Laura Analía
Formato: Trabajo final de grado
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias 2024
Materias:
Acceso en línea:http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/53990
Aporte de:
id I48-R184-123456789-53990
record_format dspace
spelling I48-R184-123456789-539902024-10-23T11:34:24Z Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico Solís, José Alberto Lozina, Laura Analía Del Río Álvarez, Florencia Clínica de grandes animales Babesia bovis Babesia bigemina Hemoparásitos Deshidratación Eritrocitos Inmunoterapia El objetivo planteado en el presente trabajo consiste en la búsqueda y puesta a punto de un nuevo método inmunoprofiláctico frente a la Babesiosis bovina, que implique una vacuna en su versión deshidratada. Para esto, se realizó la comparación de técnicas de deshidratación de glóbulos rojos (GR), como alternativas para la conservación de los hemoparásitos Babesia bovis (B. bovis) y Babesia bigemina (B. bigemina), que podrían ser utilizadas con fines inmunoprofilácticos. Se iniciaron cultivos in vitro a partir de eritrocitos parasitados con B. bovis y B. bigemina. Los GR obtenidos en fase estacionaria fueron centrifugados y separados del sobrenadante (SN), el cual fue descartado. El paquete globular (PG) fue mezclado en partes iguales con soluciones criopreservadas: Dimetilsulfóxido (DMSO), Polivinilpirrolidona (PVP), Glicerol y Dextrosa. Las suspensiones preparadas, se dispusieron en crioviales que pasaron a una curva de congelación y fueron sometidas a un proceso de liofilización. Se incluyó, además, el secado por spray-drying. Por ambas técnicas se obtuvo un polvo fino, uniforme y adecuadamente deshidratado. A partir de éstos, se realizaron reconstituciones con buffer fosfato (PBS), solución de Vega y Martínez (VYM), solución fisiológica, agua destilada y solución de sacarosa 0,25, 0,50 y 1 M. Fueron evaluados morfología e integridad de membrana a través de microscopía óptica, microscopía de barrido electrónico, técnicas de hemocitometría y tinciones vitales, como Azul de Tripán. Se evidenció entonces, que el crioprotector más adecuado es la PVP y que el mejor reconstituyente, tanto para los glóbulos rojos liofilizados como para los secados por aspersión fue la solución de sacarosa 0,25 M. Se obtuvieron mejores condiciones de recuperación de los eritrocitos reconstituidos en los liofilizados respecto de los obtenidos por pulverización, pudiéndose apreciar un alto número de glóbulos rojos liofilizados y reconstituidos con morfología conservada. De esta manera, se logró la deshidratación y evaluación de los reconstruidos, siendo necesarios estudios posteriores utilizando el inmunógeno en la especie susceptible. 2024-05-10T15:21:20Z 2024-05-10T15:21:20Z 2022 Trabajo final de grado Solís, José Alberto, 2022. Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico. Trabajo final de grado. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias. http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/53990 spa openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ application/pdf 16 p. application/pdf Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
institution Universidad Nacional del Nordeste
institution_str I-48
repository_str R-184
collection RIUNNE - Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
language Español
topic Clínica de grandes animales
Babesia bovis
Babesia bigemina
Hemoparásitos
Deshidratación
Eritrocitos
Inmunoterapia
spellingShingle Clínica de grandes animales
Babesia bovis
Babesia bigemina
Hemoparásitos
Deshidratación
Eritrocitos
Inmunoterapia
Solís, José Alberto
Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
topic_facet Clínica de grandes animales
Babesia bovis
Babesia bigemina
Hemoparásitos
Deshidratación
Eritrocitos
Inmunoterapia
description El objetivo planteado en el presente trabajo consiste en la búsqueda y puesta a punto de un nuevo método inmunoprofiláctico frente a la Babesiosis bovina, que implique una vacuna en su versión deshidratada. Para esto, se realizó la comparación de técnicas de deshidratación de glóbulos rojos (GR), como alternativas para la conservación de los hemoparásitos Babesia bovis (B. bovis) y Babesia bigemina (B. bigemina), que podrían ser utilizadas con fines inmunoprofilácticos. Se iniciaron cultivos in vitro a partir de eritrocitos parasitados con B. bovis y B. bigemina. Los GR obtenidos en fase estacionaria fueron centrifugados y separados del sobrenadante (SN), el cual fue descartado. El paquete globular (PG) fue mezclado en partes iguales con soluciones criopreservadas: Dimetilsulfóxido (DMSO), Polivinilpirrolidona (PVP), Glicerol y Dextrosa. Las suspensiones preparadas, se dispusieron en crioviales que pasaron a una curva de congelación y fueron sometidas a un proceso de liofilización. Se incluyó, además, el secado por spray-drying. Por ambas técnicas se obtuvo un polvo fino, uniforme y adecuadamente deshidratado. A partir de éstos, se realizaron reconstituciones con buffer fosfato (PBS), solución de Vega y Martínez (VYM), solución fisiológica, agua destilada y solución de sacarosa 0,25, 0,50 y 1 M. Fueron evaluados morfología e integridad de membrana a través de microscopía óptica, microscopía de barrido electrónico, técnicas de hemocitometría y tinciones vitales, como Azul de Tripán. Se evidenció entonces, que el crioprotector más adecuado es la PVP y que el mejor reconstituyente, tanto para los glóbulos rojos liofilizados como para los secados por aspersión fue la solución de sacarosa 0,25 M. Se obtuvieron mejores condiciones de recuperación de los eritrocitos reconstituidos en los liofilizados respecto de los obtenidos por pulverización, pudiéndose apreciar un alto número de glóbulos rojos liofilizados y reconstituidos con morfología conservada. De esta manera, se logró la deshidratación y evaluación de los reconstruidos, siendo necesarios estudios posteriores utilizando el inmunógeno en la especie susceptible.
author2 Lozina, Laura Analía
author_facet Lozina, Laura Analía
Solís, José Alberto
format Trabajo final de grado
author Solís, José Alberto
author_sort Solís, José Alberto
title Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
title_short Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
title_full Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
title_fullStr Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
title_full_unstemmed Deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con Babesia bovis y Babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
title_sort deshidratación y reconstrucción de eritrocitos parasitados con babesia bovis y babesia bigemina para permitir su uso como inmunoprofiláctico
publisher Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
publishDate 2024
url http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/53990
work_keys_str_mv AT solisjosealberto deshidratacionyreconstrucciondeeritrocitosparasitadosconbabesiabovisybabesiabigeminaparapermitirsuusocomoinmunoprofilactico
_version_ 1832345812333494272