Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco

Con el objeto de caracterizar genéticamente a un grupo de doce (n=12) reproductores bovinos en función de un polimorfismo genético del gen codificador de la Calpaína (CAPN) se extrajeron muestras sanguíneas de reproductores bovinos de un establecimiento productor del Chaco. Las mismas se conservaron...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores principales: Sosa, Fabiana Evangelina, De Biasio, María Bárbara, Almirón, Enrique Celso, Jastrzebski, Fernando Alberto
Formato: Documento de conferencia
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias 2022
Materias:
Terneza
ADN
Biología molecular
Acceso en línea:http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/49804
Aporte de:
RIUNNE - Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE) de Universidad Nacional del Nordeste
id I48-R184-123456789-49804
record_format dspace
spelling I48-R184-123456789-498042024-10-23T10:54:33Z Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco Sosa, Fabiana Evangelina De Biasio, María Bárbara Almirón, Enrique Celso Jastrzebski, Fernando Alberto Terneza ADN Biología molecular Con el objeto de caracterizar genéticamente a un grupo de doce (n=12) reproductores bovinos en función de un polimorfismo genético del gen codificador de la Calpaína (CAPN) se extrajeron muestras sanguíneas de reproductores bovinos de un establecimiento productor del Chaco. Las mismas se conservaron anticoaguladas con EDTA, siendo almacenadas posteriormente a -20°C en tubos correctamente rotulados con la identificación del animal del que procedía hasta el momento de su procesamiento en el Servicio de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Veterinarias. Se efectuó la extracción de ADN utilizando el detergente CTAB (Bromuro de cetil trimetilamonio) para la digestión celular. Se realizó purificación de ácidos nucleicos por incubación con cloroformo:alcohol isoamílico y posterior precipitación con isopropanol. El precipitado se lavó con etanol 70% y luego se resuspendió en agua destilada, conservándose a -20°C hasta su utilización. Posteriormente se realizaron reacciones de amplificación de ácidos nucleicos, utilizando los oligonucleótidos sintéticos descriptos por Corva et al., 2007 que flanquearon la zona de interés y una posterior digestión con enzimas de restricción que pusieron en evidencia dicho polimorfismo. La amplificación por PCR de un segmento del gen se realizó en un volumen final de 25pl, conteniendo: 1X de Buffer de PCR, 1,5 mM MgCl2; 0,25 mM de cada oligonucleótido cebador; 0,2mM de una mezcla equimolecular de dNTPs y 1U de Taq ADN polimerasa. La mezcla se sometió a las siguientes condiciones de amplificación: desnaturalización inicial a 95°C durante 5 min, seguida de 35 ciclos de desnaturalización a 95°C durante 45 seg, pegado de oligonucleótidos cebadores a 74°C durante 45 seg, extensión a 72°C durante 45 seg y extensión final a 72°C durante 5 min, finalizando con incubación a 4°. Los resultados fueron analizados sometiendo los productos a electroforesis en geles de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y visualizados por transiluminación UV. Se amplificó un fragmento de 215pb que luego fue sometido a digestión con la enzima Bse DI usando 10pl de los productos de amplificación obtenidos anteriormente, en un volumen final de 20pl, conteniendo las siguientes concentraciones finales de reactivos: 1X de buffer de restricción y 20U de la enzima Bse DI. La incubación se realizó a 55°C por 4 hs. Como resultado de la digestión enzimática, el tamaño de los fragmentos obtenidos luego de la electroforesis en geles de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y visualizados por transiluminación UV fue: C/C (homocigota favorable) 126pb y 89pb; C/T (heterocigota) 215pb, 126pb y 89pb; y T/T (homocigota desfavorable) 215pb, observando una frecuencia de alelos tiernos (“C”) de 0,58, con un 41,7% de homocigocis y un 33,3% de heterocigocis. 2022-08-11T11:47:32Z 2022-08-11T11:47:32Z 2017 Documento de conferencia Sosa, Fabiana Evangelina, et al., 2017. Frecuencias genotípicas del polimorfismo CAPN4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco. En: XXXVIII Sesión de Comunicaciones Científicas. Corrientes: Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias, p. 15-15. 2451-6732 http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/49804 spa openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/ application/pdf p. 15-15 application/pdf Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
institution Universidad Nacional del Nordeste
institution_str I-48
repository_str R-184
collection RIUNNE - Repositorio Institucional de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE)
language Español
topic Terneza
ADN
Biología molecular
spellingShingle Terneza
ADN
Biología molecular
Sosa, Fabiana Evangelina
De Biasio, María Bárbara
Almirón, Enrique Celso
Jastrzebski, Fernando Alberto
Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
topic_facet Terneza
ADN
Biología molecular
description Con el objeto de caracterizar genéticamente a un grupo de doce (n=12) reproductores bovinos en función de un polimorfismo genético del gen codificador de la Calpaína (CAPN) se extrajeron muestras sanguíneas de reproductores bovinos de un establecimiento productor del Chaco. Las mismas se conservaron anticoaguladas con EDTA, siendo almacenadas posteriormente a -20°C en tubos correctamente rotulados con la identificación del animal del que procedía hasta el momento de su procesamiento en el Servicio de Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Veterinarias. Se efectuó la extracción de ADN utilizando el detergente CTAB (Bromuro de cetil trimetilamonio) para la digestión celular. Se realizó purificación de ácidos nucleicos por incubación con cloroformo:alcohol isoamílico y posterior precipitación con isopropanol. El precipitado se lavó con etanol 70% y luego se resuspendió en agua destilada, conservándose a -20°C hasta su utilización. Posteriormente se realizaron reacciones de amplificación de ácidos nucleicos, utilizando los oligonucleótidos sintéticos descriptos por Corva et al., 2007 que flanquearon la zona de interés y una posterior digestión con enzimas de restricción que pusieron en evidencia dicho polimorfismo. La amplificación por PCR de un segmento del gen se realizó en un volumen final de 25pl, conteniendo: 1X de Buffer de PCR, 1,5 mM MgCl2; 0,25 mM de cada oligonucleótido cebador; 0,2mM de una mezcla equimolecular de dNTPs y 1U de Taq ADN polimerasa. La mezcla se sometió a las siguientes condiciones de amplificación: desnaturalización inicial a 95°C durante 5 min, seguida de 35 ciclos de desnaturalización a 95°C durante 45 seg, pegado de oligonucleótidos cebadores a 74°C durante 45 seg, extensión a 72°C durante 45 seg y extensión final a 72°C durante 5 min, finalizando con incubación a 4°. Los resultados fueron analizados sometiendo los productos a electroforesis en geles de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y visualizados por transiluminación UV. Se amplificó un fragmento de 215pb que luego fue sometido a digestión con la enzima Bse DI usando 10pl de los productos de amplificación obtenidos anteriormente, en un volumen final de 20pl, conteniendo las siguientes concentraciones finales de reactivos: 1X de buffer de restricción y 20U de la enzima Bse DI. La incubación se realizó a 55°C por 4 hs. Como resultado de la digestión enzimática, el tamaño de los fragmentos obtenidos luego de la electroforesis en geles de agarosa 2%, teñidos con bromuro de etidio y visualizados por transiluminación UV fue: C/C (homocigota favorable) 126pb y 89pb; C/T (heterocigota) 215pb, 126pb y 89pb; y T/T (homocigota desfavorable) 215pb, observando una frecuencia de alelos tiernos (“C”) de 0,58, con un 41,7% de homocigocis y un 33,3% de heterocigocis.
format Documento de conferencia
author Sosa, Fabiana Evangelina
De Biasio, María Bárbara
Almirón, Enrique Celso
Jastrzebski, Fernando Alberto
author_facet Sosa, Fabiana Evangelina
De Biasio, María Bárbara
Almirón, Enrique Celso
Jastrzebski, Fernando Alberto
author_sort Sosa, Fabiana Evangelina
title Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
title_short Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
title_full Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
title_fullStr Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
title_full_unstemmed Frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de Calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del Chaco
title_sort frecuencias genotípicas del polimorfismo capn4751, hallado en el gen de calpaína, en reproductores bovinos de la provincia del chaco
publisher Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Veterinarias
publishDate 2022
url http://repositorio.unne.edu.ar/handle/123456789/49804
work_keys_str_mv AT sosafabianaevangelina frecuenciasgenotipicasdelpolimorfismocapn4751halladoenelgendecalpainaenreproductoresbovinosdelaprovinciadelchaco
AT debiasiomariabarbara frecuenciasgenotipicasdelpolimorfismocapn4751halladoenelgendecalpainaenreproductoresbovinosdelaprovinciadelchaco
AT almironenriquecelso frecuenciasgenotipicasdelpolimorfismocapn4751halladoenelgendecalpainaenreproductoresbovinosdelaprovinciadelchaco
AT jastrzebskifernandoalberto frecuenciasgenotipicasdelpolimorfismocapn4751halladoenelgendecalpainaenreproductoresbovinosdelaprovinciadelchaco
_version_ 1832343622682411008

Ejemplares similares