Uso y abuso de anti-inflamatorios no esteroides en deporte humano y equino : Establecimiento de un amplio screening en sangre y orina con análisis y detección por GC-MSD

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Los anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs)son muy usados por los atletas para reducir lainflamación y el dolor. Si bien estas drogas no forman parte de la lista de substancias prohibidas por el Comité Olímpico Internacional (COI), la presencia de las mismas en las muestras de sangre y Orina de lo...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Montes, Claudia
Otros Autores: Rivier, Laurent
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 1998
Materias:
DOPING
NSAIDS
SCREENING
CROMATOGRAFIA GASEOSA
DETECTOR DE MASAS
ELECTROFORESIS CAPILAR
GAS CHROMATOGRAPHY
MASS DETECTOR
CE
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3071_Montes
http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3071_Montes_oai
Aporte de:
Repositorio Digital de la Universidad de Buenos Aires (UBA) de Universidad de Buenos Aires
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Uso y abuso de anti-inflamatorios no esteroides en deporte humano y equino : Establecimiento de un amplio screening en sangre y orina con análisis y detección por GC-MSD
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description Los anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs)son muy usados por los atletas para reducir lainflamación y el dolor. Si bien estas drogas no forman parte de la lista de substancias prohibidas por el Comité Olímpico Internacional (COI), la presencia de las mismas en las muestras de sangre y Orina de losdeportistas puede en muchos casos resultar una interferencia en los screening para detectar el usoindebido de drogas. Por otro lado, estas drogas son también utilizadas en forma abusiva en medicinaveterinaria, principalmente en competencias ecuestres y en este caso los organismos oficiales hanprohibido su uso. Las metodologías hasta hoy descriptas son costosas y complejas y la falta deespecificidad en la detección es una de las mayores limitaciones en la determinación de estas drogas en lasmuestras biológicas. En este trabajo de tesis, se ha desarrollado un screening rápido y especifico para ladetección de los NSAIDs y/o de sus metabolitos. El método consiste en una extracción alquilativa seguidade Cromatografía Gaseosa con Detector de Masas (GC-MSD), por lo que presenta las siguientes ventajas:pequeño volumen de muestra; un único solvente de extracción; el proceso de clean up y derivatización seproduce en un solo paso; alta sensibilidad; obtención rápida de datos y bajo costo. El análisis de losespectros de masas demostró que la técnica es sensible y específica como para poder identificar a un grannúmero de NSAIDs. Un análisis detallado de la fragmentación de las molécula fue de gran utilidad en laidentificación de metabolitos de los cuales no existen los patrones comerciales y de los mismos derivadosmetilados de los NSAIDs. Este análisis se presenta en una de las secciones de este trabajo de tesis. Unstandard interno fue incluido para evaluar la recuperación luego de la extracción y para calcular los tiemposde retención relativos. El valor promedio de la recuperación fue de un 83% lo que indicaría una buenaextracción. El límite de detección es de 50 ng/ml y se observó una buena linearidad hasta un valor de 10μg/ml. La Electroforesís Capilar se presenta también como técnica de screening alternativa, sin embargocomo no se disponía de detector de masas no se la pudo desarrollar como screening confirmatorio. Laextracción metilativa (EM) acoplada a GC- MSD resultó ser una técnica específica. eficiente y sensiblepara la detección de NSAIDs. El presente trabajo es sin duda una herramienta de gran utilidad para loslaboratorios de control del doping.
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spelling I28-R145-tesis_n3071_Montes_oai2023-04-26 Rivier, Laurent Erra-Balsells, Rosa Montes, Claudia 1998 Los anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDs)son muy usados por los atletas para reducir lainflamación y el dolor. Si bien estas drogas no forman parte de la lista de substancias prohibidas por el Comité Olímpico Internacional (COI), la presencia de las mismas en las muestras de sangre y Orina de losdeportistas puede en muchos casos resultar una interferencia en los screening para detectar el usoindebido de drogas. Por otro lado, estas drogas son también utilizadas en forma abusiva en medicinaveterinaria, principalmente en competencias ecuestres y en este caso los organismos oficiales hanprohibido su uso. Las metodologías hasta hoy descriptas son costosas y complejas y la falta deespecificidad en la detección es una de las mayores limitaciones en la determinación de estas drogas en lasmuestras biológicas. En este trabajo de tesis, se ha desarrollado un screening rápido y especifico para ladetección de los NSAIDs y/o de sus metabolitos. El método consiste en una extracción alquilativa seguidade Cromatografía Gaseosa con Detector de Masas (GC-MSD), por lo que presenta las siguientes ventajas:pequeño volumen de muestra; un único solvente de extracción; el proceso de clean up y derivatización seproduce en un solo paso; alta sensibilidad; obtención rápida de datos y bajo costo. El análisis de losespectros de masas demostró que la técnica es sensible y específica como para poder identificar a un grannúmero de NSAIDs. Un análisis detallado de la fragmentación de las molécula fue de gran utilidad en laidentificación de metabolitos de los cuales no existen los patrones comerciales y de los mismos derivadosmetilados de los NSAIDs. Este análisis se presenta en una de las secciones de este trabajo de tesis. Unstandard interno fue incluido para evaluar la recuperación luego de la extracción y para calcular los tiemposde retención relativos. El valor promedio de la recuperación fue de un 83% lo que indicaría una buenaextracción. El límite de detección es de 50 ng/ml y se observó una buena linearidad hasta un valor de 10μg/ml. La Electroforesís Capilar se presenta también como técnica de screening alternativa, sin embargocomo no se disponía de detector de masas no se la pudo desarrollar como screening confirmatorio. Laextracción metilativa (EM) acoplada a GC- MSD resultó ser una técnica específica. eficiente y sensiblepara la detección de NSAIDs. El presente trabajo es sin duda una herramienta de gran utilidad para loslaboratorios de control del doping. Non -steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are widely used by athletes to reduce pain andinflammation. Although they are not included in the list of banned substances of the International Olympic Comitee (IOC).the presence of NSAIDs in blood and urine samples of sportsmen may result in undesiredinterference during screening for drug abuse. In addition, NSAIDs are frequently misused in racehorsescompetitions, and banned by International Federations that regulate equestrian sports. Currentprocedures far NSAIDs determination are tedious and expensive, and lack of specific tests constitutes amajor limitation for determining NSAIDs in biological samples. In the present study, a comprehensivescreening was developed in order to obtain a rapid and specific method far the detection of NSAIDs and/ortheir metabolites. This method, consisting of an alkylative extraction coupled to Gas Chromatography -Mass Spectrometry (GC-MSD), offers the following advantages over current methodologies: little samplevolume, only one extraction solvent, clean up and derivatization in one step, high sensitivity, rapidity and lowcosts. Analysis of mass spectrum indicates that high resolution, and therefore improved selectivity wasachieved with most NSAIDs. A deep study of mass fragmentation was useful to characterise non-commercialmetabolites and methyl NSAIDs derivatives. These results are discussed in brief. An internal standard was included to evaluate post-extraction recovery and to define relative retentiontimes. Mean recovery values of 83% were obtained indicating that a high yield was achieved duringextraction procedures. Threshold values for most NSAIDs were around 50 ng/ml, and linearity was observedup to 10 μg/ml. Although Capillary Electrophoresis (CE) may potentially represent as an alternativescreening method far NSAIDs, lack of availability of a suitable Mass Spectrometry Detector at the timethe study was done prevented us from performing such a technique as a confirmatory procedure. In sum, Extractive Methylation coupled to GC-MSD, proves to be an efficient, rapid and reliable approach far highsensitivity detection of this group of substances. Methodology developed in the present study mayconstitute an useful tool for the evaluation of drug abuse during sport competitions. Fil: Montes, Claudia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. application/pdf https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3071_Montes spa Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales info:eu-repo/semantics/openAccess https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar DOPING NSAIDS SCREENING CROMATOGRAFIA GASEOSA DETECTOR DE MASAS ELECTROFORESIS CAPILAR DOPING NSAIDS SCREENING GAS CHROMATOGRAPHY MASS DETECTOR CE Uso y abuso de anti-inflamatorios no esteroides en deporte humano y equino : Establecimiento de un amplio screening en sangre y orina con análisis y detección por GC-MSD Use and abuse of non-steroidal anti-inflammatory drugs in human and equine sport : Establishment of a comprehensive screening procedure in blood and urine samples with GC-MSD analyses info:eu-repo/semantics/doctoralThesis info:ar-repo/semantics/tesis doctoral info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n3071_Montes_oai

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