Detección de moléculas relacionadas al mantenimiento de la reserva germinal en el desarrollo del ovario humano
Durante el desarrollo del ovario humano, se originan aproximadamente 7 millonesde oogonias de las cuales muchas se pierden antes e inmediatamente después delnacimiento. Esta muerte celular continúa y al inicio de la pubertad permanecen unos 400.000 oocitos viables. Considerando dicha pérdida, la fun...
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Otros Autores: | , |
Formato: | Tesis Libro |
Lenguaje: | Español |
Publicado: |
2017-12
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Acceso en línea: | Registro en la Biblioteca Digital Handle |
Aporte de: | Registro referencial: Solicitar el recurso aquí |
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502 | |b Licenciado en Ciencias Biológicas |c Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |d 2017-12-20 |g Universidad Maimónides. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico (CEBBAD) | ||
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520 | 3 | |a Durante el desarrollo del ovario humano, se originan aproximadamente 7 millonesde oogonias de las cuales muchas se pierden antes e inmediatamente después delnacimiento. Esta muerte celular continúa y al inicio de la pubertad permanecen unos 400.000 oocitos viables. Considerando dicha pérdida, la función reproductiva femeninarequiere del cuidado y uso moderado del pool de reserva germinal remanente conformadopor folículos primordiales y primarios. El desarrollo de estos folículos comienza con laactivación de algunos de ellos para iniciar su crecimiento mientras el resto permaneceinactivo. Este proceso continuo lleva a una disminución del pool original y para controlarloexisten factores intraováricos estimulatorios e inhibitorios, oocitarios y de las células de lagranulosa (CG). Sin embargo, sus mecanismos son actualmente poco conocidos. Estudios previos demostraron que la vía de señalización PI3K/AKT es crítica pararegular las funciones ováricas. FOXO3 y PTEN son factores implicados en esta vía, loscuales parecen ejercer cierta actividad para mantener el pool de folículos de reserva enestado inactivo. La proteína FOXO3 actúa como factor de transcripción dentro del núcleo yal ser fosforilada es exportada al citoplasma. La exportación de pFOXO3 en oocitos deratón coincide con la activación folicular. La proteína PTEN actúa indirectamenteinhibiendo la fosforilación de FOXO3. El objetivo de este trabajo es analizar el patrón de expresión de FOXO3 y PTENmediante Inmunohistoquímica (IHQ), Inmunohistoquímica Doble, Inmunofluorescencia (IF), Western Blot (WB) y Real Time PCR (qPCR), en muestras de ovario humano fetal,infanto-juvenil y adulto. A modo de hipótesis, se considera que estos genes se expresan enel ovario humano en las células germinales y/o somáticas y su accionar debe ocurrir en unequilibrio determinado, de modo de actuar en la activación o la inactivación delcrecimiento de cada folículo individualmente. Analizando los resultados, la proteína FOXO3 resultó mayormente negativa en elperíodo fetal. En el período infanto-juvenil se observó en gran número de folículos deestadios tempranos en núcleo oocitario, en algunos citoplasmas, y también en algunas CGde folículos avanzados. En la etapa adulta, se inmunodetectó en algunos núcleos oocitariode folículos primordiales y en CG de folículos avanzados. El factor pFOXO3 se detectóprincipalmente en la etapa infanto-juvenil en algunos folículos primordiales y primariosen citoplasma oocitario. El factor PTEN se inmunodetectó en el período infanto-juvenil en CG de folículos avanzados. También se detectó en citoplasma oocitario de algunos folículostempranos. A través de Western Blot se corroboró la presencia de PTEN en las muestras detodos los períodos estudiados y su diferente nivel de expresión en cada una. Mediante Inmunofluorescencia e Inmunohistoquímica Doble se determinó que pFOXO3 y PTEN sepresentan en pocos oocitos de folículos tempranos y, en algunos de éstos, co-localizan. Cotejando todo lo estudiado en este trabajo de investigación básica, se sugiere quela acción de FOXO3 y PTEN se presenta de manera sincronizada en tiempo y espaciodeterminando un balance a favor de la inhibición del crecimiento folicular. La activaciónfolicular resulta un proceso complejo finamente regulado por varios factores y que debecontinuar en foco de estudio. |l spa | |
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