| Sumario: | El NO es una molécula altamente difusible y reactiva producida en el sistema nerviosoque actúa como mensajero neuronal y participa en procesos fisiológicos y patológicos. El NOmodula la actividad de numerosos receptores de neurotransmisores y canales iónicos. Enparticular, los GABAARs pueden ser modulados por agentes rédox y por NO, aunque los efectosy mecanismos de este último no están claros. En esta tesis, caracterizamos los efectos del NO sobre GABAρ1Rs expresados de formaheteróloga y estudiamos la actividad de los GABAARs fásicos y tónicos de células piramidalesen rebanadas de hipocampo con distintos niveles de NO. Los receptores homoméricos GABAρ1 se expresaron en ovocitos de Xenopus laevis, ylas respuestas evocadas por GABA se registraron electrofisiológicamente, en presencia yausencia de donantes de NO. Las respuestas se potenciaron significativamente por el NO deforma rápida, reversible y dosis-dependiente. El bloqueo químico de las cisteínas mediantereactivos selectivos para sulfhidrilos previno la potenciación por NO, indicando que lascisteínas participan de la modulación. Cada subunidad ρ1 tiene solo tres cisteínas, las dosextracelulares que forman el cys-loop (C177 y C191) y una intracelular (C364). El reemplazopor alanina de la C364 no modificó los efectos del NO sobre el receptor, lo que sugiere que el NO potencia los GABAρ1Rs a través de una interacción con el cys-loop extracelular. Por otra parte, en rebanadas de hipocampo, se realizaron registros con la técnica depatch-clamp en configuración célula entera, y se estudiaron los efectos del NO sobre los GABAARs. Las corrientes fásicas se registraron aplicando puffs de GABA y, las corrientestónicas se midieron analizando la IH antes y después de la aplicación de bicuculina (BIM). Elnivel de NO se incrementó por la aplicación de donantes de NO y se disminuyó bloqueando laproducción de la NOS. El incremento en los niveles de NO no modificó significativamente laactividad de los GABAARs. Sin embargo, el bloqueo de la síntesis de NO endógeno potenció lacorriente GABAérgica tónica y la evocada por puffs de GABA. Estos resultados indican que los efectos del NO sobre los GABAARs son dependientesde la subunidad y sugieren que las acciones del NO en el hipocampo estarían en parte mediadaspor la modulación de la actividad inhibitoria.
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