Transformación genética de girasol (Helianthus annuus L.)
El girasol (Helianthus annuus L.) es una de las especies con mayor dificultad para ser transformada genéticamente debido a que es difícil combinar la transformación y la regeneración en el mismo tipo de células (Potrykus,1990). Se han reportado numerosas variantes en cuanto a la transformación de me...
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Autor principal: | |
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Formato: | Tesis Doctoral |
Lenguaje: | Español |
Publicado: |
2004
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Materias: | |
Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3796_Lewi |
Aporte de: |
Sumario: | El girasol (Helianthus annuus L.) es una de las especies con mayor dificultad para ser transformada genéticamente debido a que es difícil combinar la transformación y la regeneración en el mismo tipo de células (Potrykus,1990). Se han reportado numerosas variantes en cuanto a la transformación de meristemas derivados de embriones maduros de girasol en función de desarrollar un protocolo de transformación de mayor eficiencia y que pueda ser aplicado de rutina en ensayos con genes de interés. En el presente trabajo se ha estudiado la respuesta de diversos explantos para la transformación y regeneración y se ha logrado obtener plantas transgénicas a partir de diversos genotipos, concentrando la atención en el tratamiento de meristemas divididos del genotipo HA89. Se ajustaron las condiciones de agroinfección en cocultivo líquido para las cepas EHA 105 y C58, obteniendo una eficiencia de transformación (medida como plantas PCR positivas obtenidas en relación al número inicial de explantos tratados) de valores variables entre ensayos con promedios de 3.4% y 1.3% (para EHA105 y C58 respectivamente) y 5.23% para C58 conteniendo el plásmido 2x35SBtk. Se ha demostrado que el sistema propuesto es factible de aplicación con diversas cepas de Agrobacterium y plásmidos conteniendo distintos genes (tanto reporteros como de interés agronómico). También se ha estudiado la factibilidad de realizar ensayos a gran escala con el protocolo propuesto sin detrimento de la eficiencia de transformación. |
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