Quinasa de proteínas dependiente de Calcio de Solanum tuberosum, L. y su relación con la tuberización
Se purificó a homogeneidad una quinasa de proteínas dependiente decalcio (CDPK) de fracciones solubles de plantas de papa, (Solanumtuberosum L.). La CDPK de papa es estrictamente dependiente de calcio (K0,5= 0,6 μM) y fosforila una amplia variedad de sustratos, entre loscuales el syntide 2 es el mej...
Guardado en:
| Autor principal: | |
|---|---|
| Formato: | Tesis Doctoral |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
1997
|
| Materias: | |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2917_MacIntosh |
| Aporte de: |
| Sumario: | Se purificó a homogeneidad una quinasa de proteínas dependiente decalcio (CDPK) de fracciones solubles de plantas de papa, (Solanumtuberosum L.). La CDPK de papa es estrictamente dependiente de calcio (K0,5= 0,6 μM) y fosforila una amplia variedad de sustratos, entre loscuales el syntide 2 es el mejor aceptor de fosfatos (Km = 33 μM). Laquinasa es inhibida por quelantes de calcio, derivados de fenotiazina y W7 (IC50= 0,25 mM). Anticuerpos policlonales dirigidos contra el dominioregulatorio de la CDPK de soja reconocen un polipéptido de 53 kDa en lasfracciones purificadas de papa. En ensayos de autofosforilación la mismabanda aparece fuertemente marcada con [γ³²P]ATP en presencia de calcio. La actividad de CDPK es alta en plantas no inducidas a tuberizar, peroaumenta 2.5 veces en el comienzo del desarrollo del tubérculo y disminuyea la mitad de la actividad de las plantas no inducidas cuando el tubérculoestá completamente formado. Se observó fosforilación dependiente decalcio de sustratos endógenos específicos de los estadios tempranos deformación del tubérculo (bandas de 68, 51 y 46 kDa). Estos polipéptidosno aparecieron en plantas no inducidas ni el tubérculos maduros.indicando que éste es un evento específico de los primeros estadios. Además se detectó la defosforilación de un polipéptido específico en lasplantas inducidas, lo que sugiere la existencia de fosfatasas. Lapreincubación de los extractos crudos de estas plantas con inhibidores defosfatasas produjo un aumento del 100 % en la actividad de CDPK. El ácido jasmónico, propuesto como inductor de tuberización noindujo este proceso cuando se agregó a los medios de cultivo de plantascultivadas in vitro. Produjo un aumento del crecimiento de plantas enbajas concentraciones y una inhibición del crecimiento al tratar lasplantas con altas concentraciones. Además produjo una disminución en laactividad de CDPK de las plantas tratadas en forma dependiente de laconcentración. La sacarosa es esencial para la tuberización. Plantas tratadas conaltas concentraciones (8 %) de este azúcar presentaron un importanteaumento en la actividad de CDPK y en la actividad de fosfatasas deproteínas capaces de defosforilarsustratos de la quinasa. Nuestros resultados sugieren que la CDPK y fosfatasas asociadasparticipan en el control de los primeros estadios de tuberización y que lasacarosa probablemente interviene en esta regulación modulando laactividad de estas enzimas. El ácido jasmónico no tendría participación enlos eventos tempranos de la formación del tubérculo. |
|---|