Fosfatasas de proteínas con dominios Kelch en Arabidopsis thaliana. Estudios funcionales, estructurales y evolutivos

Las fosfatasas de proteínas con dominios Kelch (PPKL) son miembros de la familia PPP defosfatasas de serinas y treoninas que están presentes sólo en algas verdes, plantas yalveolados. Las PPKL son proteínas bimodulares con un dominio N-terminal de tipo turbina βy un dominio catalítico en el extremo...

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Detalles Bibliográficos
Autor principal: Maselli, Gustavo Ariel
Otros Autores: Mora García, Santiago
Formato: Tesis doctoral publishedVersion
Lenguaje:Español
Publicado: Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales 2016
Materias:
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6002_Maselli
https://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n6002_Maselli_oai
Aporte de:
Descripción
Sumario:Las fosfatasas de proteínas con dominios Kelch (PPKL) son miembros de la familia PPP defosfatasas de serinas y treoninas que están presentes sólo en algas verdes, plantas yalveolados. Las PPKL son proteínas bimodulares con un dominio N-terminal de tipo turbina βy un dominio catalítico en el extremo C-terminal, separados por una extensa secuenciaconectora sin homología con otras conocidas. En las plantas, las PPKLs han sido descriptascomo efectoras de la señalización por brassinosteroides y aparecen involucradas en elcontrol de la proliferación celular. En este trabajo se han reevaluado los roles de los cuatro miembros de la familia PPKLpresentes en Arabidopsis thaliana (BSL1, BSL2, BSL3 y BSU1) mediante análisis filogenéticos,funcionales y genéticos. BSL1 y BSL2/BSL3 pertenecen a dos clados evolutivos antiguos quehan sido altamente conservados en las plantas terrestres; en cambio, los genes de tipo BSU1se encuentran exclusivamente en la familia Brassicaceae y muestran una notable divergenciade secuencia, incluso entre especies estrechamente emparentadas. La pérdida de funciónsimultánea de dos parálogos cercanamente relacionados, BSL2 y BSL3, causa un conjunto dealteraciones fenotípicas peculiares y novedosas; la pérdida de función de BSL1 es, encambio, fenotípicamente silenciosa. Sin embargo, los tres parálogos más importantescumplen juntos un papel esencial en etapas tempranas del desarrollo, en el cual BSU1 nopuede suplantarlos. Estos patrones evolutivos se ven reflejados en un comportamientoinusual de las PPKL que las diferencia del resto de las fosfatasas de tipo PPP: su capacidad departicipar en interacciones homotípicas. BSL1, BSL2 y BSL3 se comportan in vivo comohomodímeros, mientras que BSU1 sólo es capaz de realizar interacciones débiles y/otransitorias consigo misma. Curiosamente, se encontró que los determinantes de lainteracción son diferentes entre los miembros de los clados principales. En BSL1, el dominiocatalítico es el principal impulsor de la interacción; en contraste, el dominio catalítico de BSL2 es necesario, pero no suficiente, y la dimerización requiere de dos porciones desecuencia en el dominio conector. El dominio conector de BSL2 se comporta en solucióncomo una proteína intrínsecamente desordenada propensa a formar elementos deestructura secundaria frente a perturbaciones leves del medio. La presencia de un miembro altamente divergente, en conjunto con la inusual capacidad deformar homodímeros y las diferencias presentes entre parálogos con alto grado deconservación, ponen de manifiesto la complejidad de esta pequeña y esencial familia génica,al tiempo que cuestionan los fundamentos de la asignación de sus roles funcionales.